HG/T 4106-2009 稳定性同位素15N标记的三肽 免费下载

5.2.3仪器和设备

5.2.3.1通常实验室用玻璃仪器及设备;

5.2.3.2高效液相色谱仪,配备紫外检测器;

5.2.3.3恒温干燥箱,可控制温度(150±5)℃;

5.2.3.4水解管:玻璃小管,中5 mmX 50 mm;

5.2.3.5反应瓶:耐压螺盖硬质玻璃瓶,体积20mL~30mL;

5.2.3.6真空干燥箱 ,温度可调节,真空度可达-0.1MPa;

5.2.3.7涡旋混合器;

5.2.3.8天平:十万分之一。

5.2.4分析步骤

5.2.4.1样品水解

称量(0.5~1.0)mg 15N标记三肽试样,精确到0.01mg。称好的样品置于水解管中,再将水解管置于干燥反应瓶中,30°C真空干燥1h。向反应瓶中加入苯酚盐酸溶液,用氮气置换瓶内空气15s,迅速拧紧反应瓶螺丝盖。将反应瓶置于(150±5)°C的恒温干燥箱内水解2h,取出冷却至室温,将水解管外壁的盐酸擦去,放入另一干燥反应瓶中30°C真空干燥3h。同时称取与15N标记三肽水解得到的氨基酸量相当量的氨基酸对照品,采用同样的方法进行水解,真空干燥。

5.2.4.2样品衍生